Terapia de Stem Cell    

La terapia con células madre adiposas es un tratamiento alternativo para ayudar a manejar las complicaciones de la diabetes. Las células madre pueden tener el potencial de reemplazar innumerables células del cuerpo, incluidas las células productoras de insulina, pueden ayudar en la rehabilitación del cuerpo mediante la sustitución de células enfermas.

El experimento: El equipo creó un modelo de ratón de la diabetes tipo 2 mediante la inducción de algunos marcadores de la enfermedad en los animale la obesidad , baja respuesta a los niveles de insulina y glucosa en la sangre de darles de comer una dieta alta en grasas. Luego, el equipo trasplantó ratones con células progenitoras pancreáticas encapsuladas derivadas de embriones humanos células madre.

Referencias:

• Gimeno G. [Internet]. Buenos Aires. [citado el 18 de junio del 2017] Disponible  en: http://www.medicinabuenosaires.com/revistas/vol71-11/3/vol.%2071_n3_p.%20267-273.pdf

              Ejemplo de transgénico animal

Proceso de obtención de una proteína recombinante

El resultado fue una insulina humana (denominada comercialmente Humulin), más barata de producir, potente y segura, ya que no mostraba los problemas que producían las homólogas animales, fue la primera proteína recombinante aprobada como medicamento.

Hoy en día, prácticamente todos los diabéticos son tratados con algún tipo de insulina recombinante, pues se han conseguido numerosos análogos con diferentes cualidades.

Humulin

Por ejemplo, científicos argentinos han obtenido vacas transgénicas que producen leche enriquecida en pro-insulina humana, que evitarían tener que purificar la proteína, pues únicamente habría que consumir la leche.

Referencias:

•  Dorfman M. [Internet]. Chile. [citado el 1 de junio del 2017] Disponible  en: http://www.sofarchi.cl/medios/pub/Dorfman_MD_Revista_de_Farmacologia_de_Chile_2012_V5_N1.pdf

Ejemplo de ADN recombinante en la naturaleza      y ejemplo de ADN recombinante artificial

Ejemplo de ADN Recombinante en la Naturaleza

Un ejemplo de ADN Recombinante que ocurre normalmente en la naturaleza,  es la Recombinación genética, la cual es un proceso que lleva a la obtención de un nuevo genotipo a través del intercambio de material genético entre secuencias homólogas de ADN de dos orígenes diferentes.

Existen varios tipos de Recombinación genética en células eucariotas como:

• Recombinación homóloga
• Entrecruzamiento cromosómico
• Recombinación específica en sitio
• Recombinación no homóloga

Ejemplo de ADN Recombinante Artificial

Es una célula de ADN artificial integrada de manera deliberada in vitro por la desunión de secuencias de ADN provenientes de dos organismos distintos que normalmente no se encuentran juntos.

Referencias:

• Revista CENIC Ciencias Biológicas [Internet]. México. [citado el 04 de junio del 2017] Disponible  en: http://www.redalyc.org/pdf/1812/181220509063.pdf

        Prueba molecular para diabetes mellitus

Forma parte de la Nanotecnología, cuando se utiliza estos microarrays o microchips, se realizan, de manera simultánea, decenas de miles de reacciones en el espacio de un portaobjetos de microscopía. En los que se analiza el ARNm aislado de una muestra biológica para determinar el nivel de transcripción de la totalidad del genoma denominado transcriptoma. 
La aplicación de los microarrays para dilucidar el papel de la proteína de unión a retinol 4 como vínculo entre la obesidad y DM2. 

Referencias: 

• Sekhar  Ch. [Internet]. India. [citado el 28 de Mayo del 2017] Disponible  en: http://www.ijetch.org/papers/243-T686.pdf

Prueba de PCR para diabetes mellitus

Para esta prueba se utiliza el ADN extraído del paciente, posteriormente se amplifica el gen candidato utilizando cebadores específicos de este gen, al cual se le considera un marcador molecular, pasando por diversos procesos, tales como la desnaturalización, alineamiento y extensión.

En ese contexto, los genes CAPN10 y PPARγ son los candidatos más prometedores para diagnosticar y prevenir de manera oportuna el desarrollo de la diabetes.

Tipo de muestra: Sangre en ayuno

Extracción.- ADN genómico de linfocitos

• Lisis Separación  y Purificación: Según el método de Miller modificado, utilizando un kit de reactivos (Puregene Blood Kit de Gentra System).
  
• Gen amplificador: CAPN 10

Tipo de PCR:

• Desnaturalización:  94 ºC por 30 segundos
• Hibridación:  60 ºC por 30 segundos
• Extensión:  72 ºC por 30 segundos

Referencias:

• Morlett J. [Internet]. República oriente. [citado el 21 de mayo del 2017] Disponible  en: http://www.posgradoeinvestigacion.uadec.mx/Documentos/AQM/AQM2/MARCADORES%20MOLECULARES%20PARA%20EL%20DIAGN%C3%93STICO%20TEMPRANO%20DE%20LA%20DIABETES%20MELLITUS.pdf
• Trujeque A. [Internet]. España. [citado el 21 de mayo del 2017] Disponible  en: http://www.archivos.ujat.mx/dip/Nueva%20carpeta/sem%20divul/2007/dacs.pdf

                     Prueba de tamizaje 

También llamada de screening, es un método para identificar en una población sana a individuos que padezcan alguna enfermedad sin presentar síntomas.

Examen de glucemia

Es un examen que mide la concentración de glucosa en la sangre, podemos tomar como referencia:

Para definir si el resultado es normal o no, se establecieron escalas o umbrales:

• Por debajo de los 70 ml/dl: si el valor es inferior a 70, se dice que hay hipoglucemia, es decir, el nivel de glucosa en sangre está por debajo de lo normal.
• Por encima de los 126 ml/dl: cuando el resultado indica 126 o más miligramos de glucosa en sangre, entonces el médico puede diagnosticar diabetes.

Referencias:

• Alvear M. [Internet]. México. [citado el 12 de junio del 2017] Disponible  en: http://www.scielo.br/pdf/csp/v26n2/09.pdf

Alteraciones de Epigenética

Las modificaciones epigenéticas pueden ser transmitidas de una generación celular a la siguiente (herencia mitótica) y entre las generaciones de una especie (herencia meiótica).

Los factores epigenéticos incluyen metilaciones ADN, modificaciones de las histonas y micro-ARN, y pueden ayudar a explicar cómo las células con ADN idéntico pueden diferenciarse en diferentes tipos de células con diferentes fenotipos. 

Entre otros factores epigenéticos también pueden verse afectados por el medio ambiente, haciéndolos mecanismos patógenos potencialmente importantes en enfermedades multifactoriales complejas,

obesidad, la reducción de la actividad física y el envejecimiento aumentan la susceptibilidad a la diabetes tipo 2.

 

Referencias:

·  Valladares A. [Internet]. México. [citado el 7 de mayo del 2017]. Disponible en:  http://www.medigraphic.com/pdfs/imss/im-2014/ims141o.pdf

· Storino M.[Internet]. México.[citado el 7 de mayo del 2017]. Disponible en: http://www.medigraphic.com/pdfs/endoc/er-2012/er124d.pdf

           Alteraciones de traducción

En ella ocurre una alteración en la traducción de uno de los factores que interviene en la producción de glucotransportadores, que son proteínas que se encuentran en las membranas de las células para ayudar el ingreso de la Glucosa a las células.

Un nuevo tipo de ARN, el ARN largo no codificante (long noncoding RNA o ARNlnc), está relacionado con la forma más común de diabetes, la diabetes de tipo 2, y con la maduración celular que permite la aparición de las células beta pancreáticas en embriones.

 Referencias:

• http://www.intramed.net/userfiles/2012/file/guias_diabetes1.pdf
• http://www.revespcardiol.org/es/diagnostico-clasificacion-patogenia-diabetes-mellitus/articulo/13031154/

Más información:

• http://www.medigraphic.com/pdfs/bioquimia/bq-2003/bq032d.pdf

• http://blog.hospitalclinic.org/es/2012/10/investigadores-del-idibaps-vinculan-un-nuevo-tipo-de-arn-con-la-diabetes/

Alteraciones de transcripción 

En estudios se ha determinado un tipo específico de diabetes llamada también MODY. Donde los factores de transcripción hepatonucleares cumplen un papel clave en el desarrollo y proliferación de células beta, así como en el metabolismo de la célula beta madura

Los estudios moleculares ayudan a demostrar mutaciones en  estos factores de donde se verá afectada la expresión del gen de la insulina o mutaciones en la enzima glucoquinasa, por lo tanto la producción de insulina será insuficiente o nula.

Los factores de transcripción son proteínas intracelulares que regulan la transcripción del gen de la insulina a ARNm: 

• El factor promotor de insulina 1 (IPF-1) (MODY 4)
• Los genes HNF-1 α(MODY 3), 4α (MODY 1) y 1 β,(MO DY 5) que se expresan en el hígado y en los islotes.

Referencias:

• http://scielo.sld.cu/pdf/end/v23n2/end08212.pdf 
• http://www.ujaen.es/investiga/inmunoge/gmo/articulos_espanol/diabetes.pdf

Alteraciones de la replicación o alteraciones genómicas

 La principal región genómica asociada con el riesgo de DM1 y de otras enfermedades autoinmunes es el complejo mayor de histocompatibilidad (major compatibility complex, MHC) que incluye a los genes que codifican el antígeno leucocitario humano (human leucocyte antigen, HLA), crucial para la presentación de antígenos.

Es una entidad clínica y genéticamente heterogénea. Mutaciones en el gen de la glucocinasa y de los factores transcripcionales HNF-1a, HNF-4a, IPF-1, HNF-1b y HNF-3b.

Referencias:

• http://www.clc.cl/clcprod/media/contenidos/pdf/MED_20_5/15_Dr_Julio.pdf

• http://ocw.unican.es/ciencias-de-la-salud/enfermedades-del-sistema-endocrino-y-trastornos/materiales-de-clase-1/tema16.pdf